Supporto per vitrificazione e crioconservazione

La vitrificazione è una tecnica avanzata di crioconservazione utilizzata nella Procreazione Medicalmente Assistita per preservare ovociti ed embrioni mediante un raffreddamento rapidissimo a temperature estremamente basse. A differenza del congelamento lento tradizionale, la vitrificazione impedisce la formazione di cristalli di ghiaccio, che potrebbero danneggiare le cellule.

Come si utilizza:

CONGELAMENTO:

• • Preparare un contenitore idoneo con azoto liquido (LN₂) pulito (preferibilmente sterile certificato) e il recipiente prescelto per alloggiare il SUPERVITRI™ durante il criostoccaggio.
• Preparare i campioni per la vitrificazione secondo le raccomandazioni del kit utilizzato.
• Utilizzando una micropipetta, caricare con cura un massimo di tre (3) ovociti/embrioni in un volume minimo (< 0.5 µl) sulla superficie concava in prossimità della punta del dispositivo.
• Durante le procedure in azoto liquido, maneggiare sempre il dispositivo SUPERVITRI™ e il relativo tappo utilizzando pinzette sterili in acciaio inossidabile.

Il dispositivo SUPERVITRI™ può essere utilizzato in modalità di vitrificazione chiusa o aperta.

Opzione 1 – Vitrificazione chiusa

• Utilizzare i due segni neri come riferimento per l’area di caricamento. Prima di sigillare il SUPERVITRI™, raffreddare il tappo per almeno 2 secondi immergendolo parzialmente nell’azoto liquido. L’apertura del tappo deve rimanere al di sopra del livello del liquido.
• Subito dopo il caricamento del campione, chiudere il SUPERVITRI™ nella fase di vapore sopra l’azoto liquido, mantenendo fermo il tappo.
• Senza muovere il tappo, inserire con cautela la punta del dispositivo nel tappo precedentemente raffreddato. Premere il corpo facendolo avanzare e contemporaneamente avvitarlo molto delicatamente, garantendo una chiusura ermetica.
• Verificare che, al termine della chiusura del dispositivo, le frecce stampate sul tappo e sul corpo del SUPERVITRI™ siano allineate.
• Immergere quindi il dispositivo chiuso nell’azoto liquido.

Opzione 2 – Vitrificazione aperta

• In caso di vitrificazione aperta, utilizzare azoto liquido sterile e contenitori sterilizzati.
• Utilizzare i due segni neri come riferimento per l’area di caricamento. Prima di sigillare il SUPERVITRI™, raffreddare il tappo per almeno 2 secondi immergendolo completamente nell’azoto liquido.
• Subito dopo il caricamento del campione, immergere dapprima la punta e successivamente l’intero dispositivo SUPERVITRI™ nell’azoto liquido. Mantenendo fermo il tappo, inserire con cautela la punta del dispositivo nel tappo mentre entrambi sono immersi nell’azoto liquido. Premere il corpo facendolo avanzare e contemporaneamente avvitarlo molto delicatamente, garantendo una chiusura ermetica.
• Verificare che, al termine della chiusura del dispositivo, le frecce stampate sul tappo e sul corpo del SUPERVITRI™ siano allineate.

SCONGELAMENTO

• Preparare i mezzi di scongelamento secondo le raccomandazioni del kit selezionato.
• Estrarre il SUPERVITRI™ dal criostoccaggio e trasferirlo in un contenitore trasportabile, mantenendo la punta completamente immersa in azoto liquido pulito (preferibilmente sterile certificato).
• Aprire il SUPERVITRI™ tirando e ruotando contemporaneamente il tappo rispetto al corpo del dispositivo.
• Immergere rapidamente la punta del SUPERVITRI™ contenente gli ovociti/embrioni vitrificati nella soluzione di scongelamento.
• Sotto osservazione microscopica, muovere delicatamente il SUPERVITRI™ fino al rilascio degli ovociti/embrioni dalla punta.
• Completare la procedura di scongelamento seguendo le raccomandazioni del kit utilizzato.

Questa tecnica altamente efficace migliora significativamente il tasso di sopravvivenza di ovociti ed embrioni, aumentando le probabilità di successo dei trattamenti per la fertilità.